Область научных интересов
Область научных интересов
Работа Лаборатории направлена на изучение роли оксидативного стресса в сердечно-сосудистых заболеваниях. Работа проводится в 3-х основных направлениях:
«Изучение влияния окислительно-модифицированных липидов и белков на функции клеток крови и сосудов и процессы тромбообразования»
Задачи:
- Исследование влияния окислительно-модифицированного альбумина на функции клеток крови и эндотелиальные клетки, а также на систему свёртывания крови.
- Исследование динамики изменения размера окислительно-модифицированного фибриногена в различных моделях свободно-радикального окисления.
Методы:
- турбидиметрия
- хемилюминесценция
- ИФА-анализ
- цитофлюориметрия
- коагулометрия
- метод регистрации динамического рассеяния света
- метод изучения связывающей способности сыворотки в отношении ионов Co, который даёт информацию о степени ишемии органов и всего организма
Ответственные исполнители по теме:
Асейчев А.В., Бекман Э.М., Пирязев А.П., Щегловитова О.Н., Швачко А.Г.
Разработка метода оценки степени тяжести заболеваний, прогноза их течения и эффективности проводимой терапии у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями, основанные на регистрации маркёров оксидативного стресса
По данному направлению проводятся изучение взаимосвязи между клинико-биохимическими показателями у больных с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и показателями, характеризующими оксидативный стресс.
В лаборатории проводится анализ следующих маркёров оксидативного стресса:
I. Окисленные липиды:
1) Первичные продукты окисления липидов:
- Гидроперекиси, диеновые коньюгаты.
2) Вторичные продукты окисления липидов:
- ТБК-реактивные продукты, простагландин F2ά (совместно с лаб. ген. инж.)
- Индуцированная хемилюменесценция
II. Продукты окисления белков:
- Карбонильные продукты окисления белков
- Битирозиновые продукты окисления белков
- Определение SH-групп белков
- Определение «продвинутых» продуктов окисления белка – AOPP
- Определение содержания окислительно-модифицированного фибриногена
- Определение ишемически-модифицированного альбумина: методом связывания с ионами Со
- Определение нарушения связывающей способности сывороточного альбумина с помощью флуоресцентного зонда К-35
III. Определение активности и содержания проокислительных (про/о) и антиокислительных (а/о) ферментов в плазме крови.
- Определение активности антиокислительных ферментов: супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, каталазы в плазме крови.
- Определение активности про/о фермента миелопероксидазы, которая характеризует степень выраженности окислительного стресса
- Определение содержания а/о и про/о ферментов методами ИФА-анализа
Разработка методики оценки содержания наночастиц (НЧ) золота в крови и исследование влияния наночастиц на клетки крови, а также систему свѐртывания
По данному направлению проводятся исследования:
I. Изучение возможности детекции наночастиц золота в различных биологических средах: воде, буферных системах, растворах разведѐнной и цельной плазмы, в цельной крови;
- Исследование характера зависимости интенсивности поглощения или рассеяния света наночастицами золота от их концентрации;
- Определение диапазона размеров частиц, которые можно определять методами абсорбции и рассеяния света;
- Определение верхнего и нижнего пределов измерения наночастиц золота;
- Разработка методического подхода по определению наночастиц золота в плазме крови на основе детекции наночастиц золота оптико-спектральными методами в разведѐнной плазме.
II. Исследование влияния золотых НЧ на функции клеток крови: лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов.
Задачи исследования:
- Исследование влияния НЧ золота на продукцию активных форм кислорода (АФК) лейкоцитами.
- Исследование влияния НЧ золота на осмотический и индуцированный третбутилгидроперекисью гемолиз эритроцитов и на агрегацию эритроцитов.
- Исследование спонтанной и АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в присутствии НЧ золота.
Методы исследования.
Регистрация спектров поглощения НЧ проводятся на спекторофотометре Beckman DU-530.
Определение размеров НЧ. Измерение гидродинамических размеров (диаметра) НЧ проводится методом динамического рассеяния света на приборе Zetasizer Nano ZS (фирма Malvern, Великобритания).
Ответственные исполнители:
Бекман Э.М., Асейчев А.В., Пирязев А.П., Дудник Л.Б., Швачко А.Г.