Лаборатория биофизических основ патологии

Область научных интересов

Область научных интересов

Работа Лаборатории направлена на изучение роли оксидативного стресса в сердечно-сосудистых заболеваниях. Работа проводится в 3-х основных направлениях:

«Изучение влияния окислительно-модифицированных липидов и белков на функции клеток крови и сосудов и процессы тромбообразования»

Задачи:

  1. Исследование влияния окислительно-модифицированного альбумина на функции клеток крови и эндотелиальные клетки, а также на систему свёртывания крови.
  2. Исследование динамики изменения размера окислительно-модифицированного фибриногена в различных моделях свободно-радикального окисления.

Методы:

  • турбидиметрия
  • хемилюминесценция
  • ИФА-анализ
  • цитофлюориметрия
  • коагулометрия
  • метод регистрации динамического рассеяния света
  • метод изучения связывающей способности сыворотки в отношении ионов Co, который даёт информацию о степени ишемии органов и всего организма

Ответственные исполнители по теме:
Асейчев А.В., Бекман Э.М., Пирязев А.П., Щегловитова О.Н., Швачко А.Г.

Разработка метода оценки степени тяжести заболеваний, прогноза их течения и эффективности проводимой терапии у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями, основанные на регистрации маркёров оксидативного стресса

По данному направлению проводятся изучение взаимосвязи между клинико-биохимическими показателями у больных с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и показателями, характеризующими оксидативный стресс.

В лаборатории проводится анализ следующих маркёров оксидативного стресса:

I. Окисленные липиды:
1) Первичные продукты окисления липидов:

  • Гидроперекиси, диеновые коньюгаты.

2) Вторичные продукты окисления липидов:

  • ТБК-реактивные продукты, простагландин F2ά (совместно с лаб. ген. инж.)
  • Индуцированная хемилюменесценция

II. Продукты окисления белков:

  • Карбонильные продукты окисления белков
  • Битирозиновые продукты окисления белков
  • Определение SH-групп белков
  • Определение «продвинутых» продуктов окисления белка – AOPP
  • Определение содержания окислительно-модифицированного фибриногена
  • Определение ишемически-модифицированного альбумина: методом связывания с ионами Со
  • Определение нарушения связывающей способности сывороточного альбумина с помощью флуоресцентного зонда К-35

III. Определение активности и содержания проокислительных (про/о) и антиокислительных (а/о) ферментов в плазме крови.

  • Определение активности антиокислительных ферментов: супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, каталазы в плазме крови.
  • Определение активности про/о фермента миелопероксидазы, которая характеризует степень выраженности окислительного стресса
  • Определение содержания а/о и про/о ферментов методами ИФА-анализа

Разработка методики оценки содержания наночастиц (НЧ) золота в крови и исследование влияния наночастиц на клетки крови, а также систему свѐртывания

По данному направлению проводятся исследования:

I. Изучение возможности детекции наночастиц золота в различных биологических средах: воде, буферных системах, растворах разведѐнной и цельной плазмы, в цельной крови;

  1. Исследование характера зависимости интенсивности поглощения или рассеяния света наночастицами золота от их концентрации;
  2. Определение диапазона размеров частиц, которые можно определять методами абсорбции и рассеяния света;
  3. Определение верхнего и нижнего пределов измерения наночастиц золота;
  4. Разработка методического подхода по определению наночастиц золота в плазме крови на основе детекции наночастиц золота оптико-спектральными методами в разведѐнной плазме.

II. Исследование влияния золотых НЧ на функции клеток крови: лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов.

Задачи исследования:

  1. Исследование влияния НЧ золота на продукцию активных форм кислорода (АФК) лейкоцитами.
  2. Исследование влияния НЧ золота на осмотический и индуцированный третбутилгидроперекисью гемолиз эритроцитов и на агрегацию эритроцитов.
  3. Исследование спонтанной и АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в присутствии НЧ золота.

Методы исследования.
Регистрация спектров поглощения НЧ проводятся на спекторофотометре Beckman DU-530.
Определение размеров НЧ. Измерение гидродинамических размеров (диаметра) НЧ проводится методом динамического рассеяния света на приборе Zetasizer Nano ZS (фирма Malvern, Великобритания).

Ответственные исполнители:
Бекман Э.М., Асейчев А.В., Пирязев А.П., Дудник Л.Б., Швачко А.Г.